精子顶体酶活性的定量检测
来源:杭州三代试管婴儿医院发布时间:2023-12-22 18:41:25浏览次数:130次手机端查看
顶体酶的活性可以反映精子的质量。顶体酶活性不足可导致不孕。因此,顶体酶活性测定是评价男性朋友精子和生育能力最重要的指标。顶体酶活性范围正常为4.3 至58.2 单位/升。那么,精子顶体酶活性的定量检测我们应该了解哪些知识呢?另外,成熟的精子是什么颜色的?
精子顶体酶活性定量检测
顶体酶存在于精子顶体的内膜和赤道膜上,通常以无活性的形式存在。当精子头部进入卵子的透明带时,顶体酶被激活成顶体酶。这种酶是受精过程中不可缺少的中性蛋白水解酶。其功能与胰蛋白酶相似。它可以水解卵子透明带糖蛋白,让精子穿过卵丘,然后穿过透明带,让精子与卵子融合。它还可以促进生殖道中激肽的释放,从而增强精子活力,促进精子运动。
(1)精子洗涤及顶体酶提取:取0.25ml液化精液于塑料离心管中,500g离心5分钟;弃去上清液,将离心管倒置在吸水纸上,除去剩余溶液。加入0.25ml 2%乙酸溶液,置于4冰箱提取过夜(16-24h),取出1000g离心10分钟,取上清备用。
(2)测定过程:将用pH8.7的0.05mol/L Tris-HCl缓冲液新鲜配制的NAD(1mg/ml)0.1ml、BAEE1mg/ml 0.5ml、ADH(3.46mg/ml)加入比色皿中。 )0.1ml和2.25ml Tris-HCl缓冲液,混合均匀,25预热5分钟,然后加入0.05ml顶体酶提取液,立即混匀。加入酶液10分钟后,记录反应液在366nm处的吸光度。变化值(A366mm/10min)。
(3)酶活力单位的定义及酶活力的计算:顶体酶活力1毫单位(mu)相当于在上述反应条件(pH 8.5、25)下每分钟水解1nmol/L BAEE。所需顶体酶的量。 1nmol/L BAEE的水解导致反应溶液的吸光度变化0.0011。 t为反应时间(10min),A为t分钟内吸光度的变化,V为加入酶液的体积(0.05ml),因为提取液的体积与原精液体积相同,所以该公式计算每毫升精液的顶体酶活性。
成熟的精子是什么颜色
有些男性朋友想了解成熟的精子是什么颜色,不同颜色对生育能力有什么影响。专家指出,男性成熟的精子在不同情况下会呈现不同的颜色。专家表示,精子的正常颜色是灰白色或微黄色。如果禁欲时间较长,由于理化性质的变化,颜色会变黄,属于正常现象。
精液常规检查是判断男性生育能力最基本、最重要的临床指标。精子需要3个月才能发育成熟。精子由精原细胞发育而来,经过低级精细胞、次级精细胞、精子细胞,最后形成精子。这个过程需要70多天,然后储存在附睾中。附睾获能的过程也需要几天的时间。
生活压力的增加和年龄的增长导致男性精液质量下降。此外,不良的生活习惯对精子的生长成熟影响很大,如:吸烟、饮酒、吃辛辣食物、洗高温桑拿、穿紧身牛仔裤、熬夜等。
男性精子在生育期的正常颜色是灰白色或微黄色。如果禁欲时间较长,由于理化性质的变化,颜色会变黄,属于正常现象。长时间不射精的人射出的精液颜色会较深。老年人的精液多呈深黄色。大约10-20分钟后,凝块会自行液化,变成半透明、混浊、稀薄的粘液。如果精液呈乳白色或黄绿色,甚至呈黄色带血,这表明生殖道有炎症,很可能是前列腺和精囊的化脓性感染,可能会导致男性不育。这种情况一定要及时治疗。